如何测定粗蛋白
粗蛋白定义为饲料样品中的氮含量乘以6.25。大多数蛋白质一般含有16%的氮,这个系数就是由此推导出来的。因此,将饲料中氮的百分比乘以100,然后除以16或6.25,即可计算出粗蛋白含量,下面我们来看看粗蛋白的测定方法!
粗蛋白测定原理
凯氏定氮法用于测定样品中的氮含量。即在催化剂的作用下,用硫酸破坏有机物,将含氮物转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏,使氨逸出。用硼酸吸收后,再用酸吸收。滴定,测定氮含量,将结果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。
粗蛋白测定试剂
1、硫酸(GB625):化学纯,含量98%,不含氮。
2、混合催化剂:硫酸铜0.4克,结晶水5克(GB665),硫酸钾(HG3-920)或硫酸钠(HG3-908)6克,均为化学纯,研磨混合。
3、氢氧化钠(GB629):化学纯,40%水溶液(m/V)。
4、硼酸(GB628):化学纯,2%水溶液(m/V)。
5、混合指示剂:甲基红(HG3-958)0.1%乙醇溶液、溴甲酚绿(HG3-1220)0.5%乙醇溶液。将两种溶液等体积混合。阴凉处保存期为三个月。
6、盐酸标准溶液:用邻苯二甲酸氢钾法标定,按克B601配制。
盐酸标准溶液:c(HCl)=0.1mol/L,8.3ml盐酸(GB622,分析纯),倒入1000ml蒸馏水中。
盐酸标准溶液:c(HCl)=0.02mol/L,1.67ml盐酸(GB622,分析纯),注入1000ml蒸馏水中。
7、蔗糖(HG3-1001):分析纯。
8、硫酸铵(GB1396):分析纯,干燥。
9、硼酸吸收液:1%硼酸水溶液1000ml,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10ml,0.1%甲基红乙醇溶液7ml,4%氢氧化钠水溶液0.5ml,混合均匀存放于阴凉处。保存期限为1个月(全自动程序)。
粗蛋白测定仪
1、实验室样品破碎机或研钵。
2、分样筛:孔径0.45mm(40目)。
3、分析天平:灵敏至0.0001克。
4.煮食炉或电炉。
5. 滴定管:酸性型,10、25ml。
6.凯氏烧瓶:250毫升。
7、凯氏定氮蒸馏装置:半痕量水蒸气蒸馏式。
8.锥形瓶:150、250毫升。
9.容量瓶:100毫升。
10.消化管:250ml。
11、定氮仪:根据凯氏定氮原理制造的各类半自动定氮仪。